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你想了解的鼠抗微囊藻毒素LR單克隆抗體上線了

　更新時間：2020-05-21 點擊量：1030

　　微囊藻毒素(MC)是一種環狀七肽物質，由古老的原核生物藍藻代謝釋放產生，有80種異構體，對動物和人有強烈的肝毒性，其中常見的MC有MC-LR、MC-RR和MC-YR。目前研究顯示水體含量高，毒性大的是MC-LR，能誘發肝癌，近期研究還發現低劑量的MC-LR即能損傷神經細胞、生殖細胞。在淡水水體富營養化的今天，藍藻爆發事件時有發生，MC污染對人類的健康造成了嚴重威脅。

　　檢測MC-LR的方法主要有物理和化學方法，物理方法主要用于定性和定量測定毒素，依靠的精密儀器，一般價格昂貴、操作繁瑣，尚不能國產化；化學方法主要用于監測水體和食物鏈中MC-LR的水平，可操作性強。本研究著眼于MC-LR的快速、靈敏、定量檢測，從反應條件、方法性能等方面評估添加酶聯免疫(ELISA)、時間分辨熒光免疫分析(TRFIA)和納米均相時間分辨熒光免疫分析法(NH-TRFIA)這三種免疫分析的特點。

　　鼠抗微囊藻毒素LR單克隆抗體利用克隆抗體技術制備抗*型抗體方法相對單抗生產技術簡單，容易操作，但如果需要量大，需要多次制備，同時需要除去抗同種型抗體。主要方法是將已生產出的單抗(Ab])直接免疫試驗動物，然后提取血清，純化血清即可。本實驗首先利用飽和硫酸銨二步沉淀法初步純化鼠抗微囊藻毒素LR單克隆抗體，再用G蛋白親和純化柱進一步純化抗體，通過SDS-PAGE電泳實驗鑒定純化*，回收率87.57%。

　　在溫和條件下采用木瓜蛋白酶酶切純化后的鼠抗微囊藻毒素LR單克隆抗體，利用DEAE-52離子交換樹脂柱分離抗體酶切片段，獲得其抗體的決定簇F(ab")2片段，并對該片段的免疫活性及產率進行測定。結果顯示該片段免疫活性降低50%為1:12000但仍然可以作為抗原制備抗*型抗體。然后利用該抗體片段作為新的免疫原，按照常規免疫方法免疫異源受體BalB/C小鼠，獲得微囊藻毒素抗*型抗體。

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